质粒是什么

携带目标基因进入宿主细胞的运载工具被称为载体，它是分子克隆技术中不可或缺的关键组成部分。在这其中，质粒是最为常见的载体。面对日益增多的质粒，正确解读质粒图谱是进行分子克隆的先决条件。下面我们一起来学习一下质粒吧！

质粒的概念

质粒是生物细胞内天然固有之一类核酸分子，其具备自主复制并能独立于寄主染色体的稳定遗传特性。质粒广泛存在于原核细菌和真菌中，其中大多数为DNA型，少数为RNA型。原生DNA质粒常呈现出共价、封闭且环状的分子结构，其分子量可涵盖1-300 kb范围。然而，由于天然存在的野生型质粒分子量较大、复制数较低、酶切位点较少且遗传标记不甚理想，难以满足基因工程载体的需求。因此，为了弥补这些不足，现今多采用人工改造的质粒作为基础，借助多种野生型质粒进行构建。

完美的质粒应具备以下特点：

复制能力：具有独立自主的复制能力，在细胞内能够迅速繁殖，从而使目标基因大量扩增；

表达能力：作为表达载体时，应能够有效地利用宿主的酶系统，实现目标基因的表达；

高度稳定性：在细胞内能够持续进行复制和表达，不易受到环境变化的影响；

酶切位点：具备适当的限制性核酸内切酶的识别和切割位点，即用于插入外源基因的位置；

遗传标记：便于对重组体进行筛选和鉴定，以确保目标基因的准确性；

分子量较小：以容纳较大的外源基因，为其提供足够的空间。

质粒分类

按功能分类:克隆载体、表达载体

1、克隆载体

具有克隆载体的基本元件（复制起始位点,抗性基因,多克隆位点等)，可以携带DNA片段或外源基因进入受体细胞并克隆和扩增DNA片段或基因的载体。

2、表达载体

除了具有克隆载体的基本元件外，还有可以表达调控目的基因的元件，即转录翻译所必需的DNA序列。

按受体细胞的类型分类：

原核载体、真核载体和穿梭载体

1、原核载体

能在原核细胞中复制和表达的载体。

2、真核载体

能在真核细胞中复制和表达的载体。

3、穿梭载体

也叫转移载体，指在两种宿主生物体内复制的载体分子，因而可以运载目的基因（穿梭往返两种生物之间）。穿梭质粒含原核和真核生物2个复制子，以确保能够在原核和真核两种宿主细胞中复制与扩增，并可以在真核细胞中有效表达。

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